欧博官网iELisa吐逆毒素检测ELISA试剂盒

提要

吐逆毒素也称为脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON），是由串珠镰刀菌、轮状镰刀菌以及多育镰刀菌等爆发的真菌毒素，大多保存于粮谷、饲料及其制品中。中毒后影响消化系统和神经系统，主要体现为吐逆、头痛、头晕、腹痛、腹泻等症状。我国标准划定：玉米、大麦、小麦及其制品中吐逆毒素不得凌驾1mg/kg，猪、犊牛、泌乳期动物配合饲料中吐逆毒素不得凌驾1mg/kg，牛、家禽配合饲料中吐逆毒素不得凌驾5mg/kg。

原理

测定的基础是抗原-抗体反应。微孔板上包被有抗抗体。加入吐逆毒素（DON）标准品或样品、酶标抗原和抗体后，游离的吐逆毒素与酶标抗原竞争团结抗体，抗体或抗体团结物与牢靠在微孔板上的抗抗体再团结，没有团结的标准品、酶标抗原及抗体被洗去，加入TMB底物显蓝色，加入终止液后颜色由蓝变黄，用酶标仪在450nm处检测，吸光值与样品中吐逆毒素含量成负相关，与标准曲线较量即可得出吐逆毒素的含量。

1. 试剂盒的组成

1. 包被有抗抗体的96微孔板：1块（96 孔，12 条×8 孔）

2. DON标准品：0ng/mL 、10ng/mL、40ng/mL、100ng/mL、250ng/mL 1 瓶 × 1.0mL

3. DON抗体：              1 瓶 × 10mL

4. DON酶标抗原：           1 瓶 × 10mL

5. 10× 浓缩洗涤液：         1 瓶 × 50mL

6. DON稀释缓冲液A：        1 瓶 × 50mL

7. DON稀释缓冲液B：        1 瓶 × 50mL

8. 显色底物TMB：           1 瓶 × 17mL

9. 终止液：                 1 瓶 × 7mL

10. 试剂盒说明书：           1份

11. 质检报告：               1份

1. 需要的仪器、试剂

1. 仪器

1. 酶标仪 450nm（iELisa全自动酶标仪或相当者）

2. 微量移液器：20μL-200μL单道，100μL-1000μL单道, 50μL-300μL八道

3. 多功效旋转混淆器（或者摇床、高速均质器）

4. 酶标板振荡器

5. 涡旋混淆器

6. 离心机

7. 50mL离心管

8. 1.5mL离心管

9. 定性滤纸

10. 过滤漏斗

11. 天平：感量0.01g

1. 试剂

1. 纯水（蒸馏水、去离子水）

适用样品：谷物（玉米、小麦、大麦、大米、大豆），饲料（高迅速度），饲料，发酵液，尿液样品。

注重事项

1. 室温低于20℃或试剂及样品未回到室温（20- 25℃）会导致数值偏低。

2. 在洗板历程中若是泛起板孔干燥过久的情形，则会泛起标准曲线不可线性，重复性欠好的征象。以是洗板排干后应连忙举行下一步操作。

3. 标准物质和显色液对光敏感，阻止直接袒露在光线下。

4. 混淆要匀称，洗板要*（包括加样品和标准液的时候都必需充分混淆匀称）。

5. 终止液为强酸性物质，阻止接触皮肤。

6. 不要使用过了有用期的试剂盒，也不要混淆使用差别批次的试剂盒，这样会引起测定效果禁绝确。

7. 试剂盒的贮存条件是2-8℃，切勿冷冻。

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性能指标

1. 检测限LOD: 谷物0.15ppm（mg/kg），饲料0.25ppm（mg/kg），发酵液0.15ppm（mg/kg）,尿液0.05ppm（mg/kg）。（LOD：空缺样品测定值+2倍标准误差SD）

2. 定量限LOQ: 谷物0.25ppm（mg/kg），饲料0.5ppm（mg/kg），发酵液0.25ppm（mg/kg）,尿液0.1ppm（mg/kg）。

3. 定量检测规模：谷物0.25-6.0ppm，饲料0.5-12.0ppm，发酵液0.25-6.0ppm,尿液0.1-1.0ppm。